Анализ пцр как берут


Анализ ПЦР - метод выявления инфекционных заболеваний человека

Полимеразная цепная реакция известна уже 30 лет. Ее широко используют во многих областях, начиная с археологии и заканчивая генетикой. Именно метод пцр помогает установить отцовство, но наиболее часто его используют для выявления различных инфекционных болезней в организме человека. Что же из себя представляет анализ методом пцр? 

Это ни что иное как имитация процесса размножения ДНК, в результате чего из крошечного фрагмента молекулы ДНК в течение некоторого времени (обычно хватает нескольких часов) получают огромное количество идентичных молекул, которые уже можно изучать. Вам это ничего не напоминает? Очень похоже на клонирование. Именно полимеразная цепная реакция является основой клонирования и применяется при воспроизводстве тканей в лабораторных условиях. Ну, а в медицине анализ пцр используют для выявления в организме человека бактерий (микоплазм, уреаплазм, хламидий, а также возбудителей гонореи и сифилиса), вирусов (ВИЧ, герпеса и папилломавируса), грибов (возбудителей кандидоза) и простейших (трихомонады). 

Данный метод молекулярной диагностики инфекционных возбудителей является наиболее чувствительным. Позволяя обнаружить даже единственный фрагмент ДНК в образце, метод пцр практически не имеет предела чувствительности. И в большинстве случаев его результат показывает 100% точность, особенно при диагностике бактериальных инфекций. Он никогда не дает ложноположительных результатов. 

Также он является универсальным, так как позволяет выявить одновременно несколько микроорганизмов в одной пробе, в то время как бактериологические методы используют разные способы культивирования для разных групп возбудителей. Кроме того, пцр существенно облегчает задачу исследователей, сокращая время на проведение теста до 24 часов и упрощая требования к транспортировке образцов. Если материал для бактериологических и вирусологических методов должен быть живым, то для метода пцр подходит все, что содержит ДНК, даже мертвые клетки. 

Анализ пцр на инфекции крайне важен потому, что большинство из них, поражая организм человека, развиваются бессимптомно или имеют схожие признаки. Так например, метод пцр широко применяют для выявления причин заболеваний печени, среди которых вирусы гепатита А, В, С, D, Е, а также вирус простого герпеса. Для борьбы с каждым из вирусов необходимо применять совершенно различные тактики лечения. Поэтому для назначения эффективной терапии врачу нужно точно выявить  возбудителя. А если проводить затяжные исследования, инфекция может перейти в хроническую форму, вызвав осложнения, которые особо опасны при беременности или других сопутствующих заболеваниях. И именно метод пцр является главным помощников в быстрой и точной диагностике.

Но здесь нужно понимать, что являясь чуть ли ни единственным методов выявления одних микроорганизмов (например, микоплазмы), пцр может совершенно не подходить для других (стафилококков, стрептококков, краснухи, токсоплазмоза и т.д.) Поэтому выбирать методы диагностики и назначать лечение должен специалист. Самостоятельно  отправляться в лабораторию и делать все анализы подряд не стоит. Они могут оказаться абсолютно бесполезными. А в частных клиниках по Вашему желанию и за Ваши деньги Вам проведут любые анализы, даже не поинтересовавшись, зачем они Вам нужны. 

Как берут анализ пцр

Для проведения исследований методом пцр используют биологические жидкости и выделения человеческого организма, в которых могут содержаться микробы и их фрагменты. К ним относятся: кровь, слюна, мокрота и моча. Кроме того, для анализа пцр берут соскобы эпителиальных клеток слизистой оболочки уретры и цервикального канала. Например, для выявления вируса ВИЧ и гепатита берут кровь из вены. Для диагностики инфекций половых органов анализируют выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала. А для диагностики инфекционного мононуклеоза используют мазок из зева. 

Подготовка к пцр анализу

Перед сдачей анализа нужно проконсультироваться с врачом и тщательно следовать его рекомендациями. Спросите у доктора, какие именно материалы будут брать для исследования. Анализ крови пцр сдают натощак. А вот перед тем, как сдавать анализ пцр в виде соскобов эпителиальных клеток, врачи рекомендуют пациентам вечером выпить пива, сходить в баню и заняться сексом. Звучит странно, но все это активизирует  инфекцию в половых органах, которая может протекать в очень слабой форме, и помогает ее выявить. 

Расшифровка пцр анализа

Результат анализа пцр может быть положительным и отрицательным. Это всегда отмечают в документе, который в обязательном порядке должны выдать в лаборатории. Положительный результат означает, что в биологическом материале, который сдал пациент, были обнаружен ДНК инфекции. Отрицательный результат означает отсутствие инфекции в организме человека. 

Так как метод пцр обладает высокой чувствительностью, использовать его для контроля эффективности лечения нужно очень осторожно и только спустя несколько недель после проведенной терапии. Ведь даже фрагмент ДНК мертвого возбудителя даст положительный результат анализа пцр. 

Полимеразная цепная реакция помогает врачам диагностировать инфекции, которые протекают в организме человека в скрытой форме, не допуская их развития и сильного поражения внутренних органов. Внимательно следите за состоянием своего здоровья и при первых подозрениях на наличие у Вас инфекции обращайтесь к доктору. 

bambinostory.com

Анализ ПЦР: расшифровка, как берут у мужчин и женщин

Содержание статьи:

Высокоинформативный метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) дает возможность раннего выявления различных генетических и инфекционных болезней, протекающих остро или хронически. Причем выявить их можно еще на том этапе, когда они не проявляют себя никакими симптомами. Чаще всего к анализу ПЦР прибегают для обнаружения инфекций передающихся половым путем (ЗППП, ИППП).

Что такое ПЦР анализ

Анализ ПЦР относится к молекулярному методу диагностики, который основан на многократном увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) возбудителя в любом биологическом материале (мазке из шейки матки, влагалища, уретры, крови, слюны, мокроте и т. д.) и сопоставление его ДНК или РНК с базой данных известных видов возбудителей инфекций. Методика разработана американцем Кэрри Мюллисом в 80-х годах прошлого столетия. В 1993 ученый стал лауреатом Нобелевской премией в области химии. Сегодня исследование ПЦР считается своего рода «золотым стандартом» для диагностирования подавляющего большинства инфекций. Анализ ПЦР повсеместно применяется в медицинской практике для уточнения характера болезни и постановки точного диагноза. Очень часто бывают случаи, когда все известные иммунологические, вирусологические и бактериологические методы не действуют. Тогда ПЦР становится единственным способом, с помощью которого можно выявить активную стадию заболевания.

Преимущества ПЦР-диагностики над другими методами

Методика ПЦР нашла широкое применение в современной медицине благодаря ряду бесспорных преимуществ. Расскажем о них более подробно.

Возможность прямого выявления присутствия возбудителя

Многие из традиционных диагностических методик основаны на определении маркеров – белков, которые являются продуктами жизнедеятельности возбудителя болезни. Такой принцип диагностики может дать только опосредованное подтверждение патологии. Метод ПЦР обеспечивает прямое определение возбудителя, поскольку выявляет специфические участки ДНК патогенных организмов.

Высокая специфичность

Методика ПЦР отличается высокой специфичностью благодаря тому, что позволяет выявлять фрагменты ДНК, характерные только для конкретного инфекционного агента. При использовании иммунологических методов остается вероятность получить ложный результат (ошибки в диагностике связаны с перекрестно-реагирующими антигенами). Что касается ПЦР, то здесь ошибки исключены, поскольку специфичность в данном случае задается нуклеотидной последовательностью праймеров.

Высокая чувствительность

Посредством этого метода определяются даже единичные болезнетворные микроорганизмы. Возбудители инфекций выявляются в организме человека даже тогда, когда другие методы диагностики не проясняют ситуацию (речь идет о различных иммунологических микроскопических и бактериологических способах исследования). Приведем данные для сравнения. Чувствительность микроскопических и иммунологических методов составляет 103-105 клеток, а чувствительность ПЦР – 10-100 клеток в пробе.

Универсальность метода

Методика ПЦР основана на исследовании ДНК патогенных организмов. В процессе исследования определяются фрагменты РНК или ДНК, которые являются специфичными для конкретных возбудителей инфекций. Поскольку все нуклеиновые кислоты имеют сходный химический состав, при лабораторном анализе можно применять унифицированные методики. А это значит, что исследование одной пробы дает возможность выявлять сразу несколько возбудителей.

Быстрое получение результатов

Данная методика не требует выращивания культур возбудителей, на которое уходит довольно много времени. Благодаря применению унифицированной технологии обработки материала и выявления продуктов реакции, а также автоматизированному процессу амплификации вся процедура исследования занимает лишь несколько часов.

Возможность выявления инфекций в латентной форме

Методика ПЦР дает возможность эффективно выполнить доклиническую диагностику (выявление возбудителей до появления симптоматики) и ретроспективную диагностику (определение патогенов после перенесенной болезни). Так, доклиническая диагностика имеет большое значение при обследовании пациента в инкубационном периоде возможного заболевания – после предполагаемого заражения до возникновения первых признаков. Одним из важных преимуществ ПЦР является возможность использования для анализа биологических остатков или архивных материалов. Это дает возможность идентифицировать отцовство и личность. На сегодняшний день методы ПЦР-диагностики продолжают развиваться. Усовершенствуется сама технология проведения анализа, а также появляются новые виды ПЦР. В медицинскую практику внедряются инновационные тест-системы для этой реакции. Благодаря такому быстрому развитию науки стоимость процедуры уменьшается, и теперь обследование ПЦР может применяться для многих категорий пациентов.

Суть метода ПЦР

В основе этого метода диагностики лежит многократное удвоение данного участка РНК или ДНК. Этот процесс реализуется в лаборатории с использованием особых ферментов. В итоге формируется столько участков ДНК (РНК), сколько нужно для визуального исследования. Во время процедуры копируется лишь участок, соответствующий заданным условиям (если он присутствует в изучаемом образце). Биологический материал, которые необходимо исследовать на наличие ДНК или РНК возбудителей помещают в амплификатор. (В зависимости от конкретной ситуации для анализа берут кровь, мочу, слюну, отделяемое из половых органов). Затем к образцам добавляют особые ферменты. Они связываются с РНК или ДНК патогенных микробов, и начинается синтез копий. Копирование представляет собой многоэтапный процесс, протекающий по типу цепной реакции. В результате возможно появление сотен или даже тысяч копий.

На следующем этапе диагностики результаты анализируются и сопоставляются с базой данных возбудителей инфекций. Методика ПЦР не просто дает возможность определить вид патогенного организма, но и позволяет сделать выводы о количестве возбудителей инфекции в человеческом организме. Сегодня применение подобных технологий открывает широкие возможности при исследовании мутаций, сращивания участков ДНК. В современной медицине метод начал применяться для определения отцовства, выявления новых генов и многого другого. Благодаря своей универсальности метод ПЦР нашел широкое применение в урологии, гинекологии, пульмонологии, онкологии, гематологии, фтизиатрии, практике инфекциониста и других областях медицины.

Материал для анализа ПЦР

Для ПЦР диагностики применяются различные биологические среды и жидкости, взятые из организма человека: мокрота, слизь, слюна, моча, кровь, соскоб эпителиальных клеток, ткани плаценты, плевральная жидкость, околоплодная жидкость, сок простаты и др. При диагностике ЗППП (ИППП) анализу подвергаются выделения из мужских и женских половых органов. Для этого выполняют мазок или соскоб из уретры или шейки матки. Также для исследования используют мочу. Для выявления инфекций (герпес, мононуклеоз, ЦМВИ, токсоплазмоз, ВИЧ, гепатиты В и С) на анализ берут кровь. При подозрениях на поражения нервной системы производят забор спинномозговой жидкости. Для пульмонологических исследований используют плевральную жидкость и мокроту. Для выявления внутриутробных инфекций анализу подвергают ткани плаценты и околоплодную жидкость.

ПЦР на ИППП и другие инфекции

Какие инфекции можно выявить с помощью анализа ПЦР

- ВИЧ-инфекция (можно выявить вирус иммунодефицита человека ВИЧ-1). - Вирусные гепатиты А, В, С, G ( РНК-HAV, ДНК-HBV, РНК-HCV, РНК-HGV). - ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз. - Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ). - Цитомегаловирусная инфекция (ДНК-CMV). - Герпетическая инфекция (ДНК- вируса простого герпеса ВПГ 1 и 2 типа). - Туберкулез (микобактерия туберкулеза). - Онкогенные вирусы – папилломавирусная инфекция (вирус папилломы человека (в том числе его онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59). - Боррелиоз, клещевой энцефалит. - Листериоз. - Кандидоз (грибы рода Candida). - Хеликобактерная инфекция (Helicobacter pylori) и другие.

Подготовка и сдача анализа ПЦР

Пациенты, сдавшие материал для проведения ПЦР диагностики, рассчитывают на получение быстрого и точного результата. При этом нужно учесть один важный момент – достоверность диагностики зависит не только от профессионализма специалистов и возможностей медицинской лаборатории. Чтобы исследование было информативным, должен приложить усилия и сам больной. Так, необходимо строго придерживаться всех рекомендаций доктора и тщательно соблюдать правила подготовки к сбору материала. Очень важно не допустить загрязнения биологических образцов, иначе результаты обследования будут искажены.

Подготовка к анализу ПЦР

Подготовка к процедуре не связана особыми сложностями. Достаточно запомнить несколько правил:

- Кровь на анализ ПЦР сдается натощак. Кровь берут из вены обычно с утра стерильной иголкой в специальный контейнер. - В течение суток до забора материала показано половое воздержание при взятие мазка ПЦР на ИППП. - Для анализа мочи на ПЦР берется первая порция, емкость должна быть стерильной.

Как берут анализ ПЦР у мужчин и женщин

Анализ ПЦР берут у мужчин и женщин в прививочном кабинете, это кровь из вены, слюну, мазки из глотки, миндалин, смывы из носоглотки и т.д. Метод забора не отличается. ПЦР на ИППП сдают в женской консультации при гинекологическом осмотре у женщин, это мазки из влагалища, шейки матки, уретры. У мужчин во время посещения андролога или венеролога, это мазок из уретры.
Схемы забора материала на ПЦР

Схема забора материала на ПЦР из носа

Схема забора материала на ПЦР с миндалин

Схема забора материала на ПЦР со слизистой глаз

Схема забора материала на ПЦР со слизистой щеки

Схема забора материала на ПЦР у женщин

Схема забора материала на ПЦР у мужчин

Сколько по времени делается ПЦР

Пациентам не приходится долго ждать результатов ПЦР-обследования. На всю процедуру анализа обычно уходит от нескольких часов (ПЦР в реальном времени) до 2-10 суток. Как правило, результаты анализа на руки пациент получает через 2-5 дней, максимально до 10 дней, это зависит от вида анализа. Дольше всего делается ПЦР-диагностика крови на ВИЧ и гепатиты, а меньше всего мазки и соскобы - 2-3 дня.

Расшифровка ПЦР анализа

Отрицательный результат говорит о том, что на данный момент в биологическом материале не выявляются следы возбудителей инфекции. То есть инфекция, по поводу которой проводилось обследование, отсутствует. Положительный результат говорит об обнаружении следов возбудителя в биологических образцах. Это значит, что в данное время в организме человека присутствует инфекция. Возможны случаи, когда ПЦР дает положительный результат, но активного инфекционного процесса не наблюдается. Речь идет о явлении, которое называют «здоровым носительством». Лечение таким пациентом не требуется, но они должны находиться под постоянным динамическим наблюдением. Такие ситуации характерны для вирусных инфекций: вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), гинитальный герпес, цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ), вирус папилломы человека(ВПЧ), при которых для исследования берутся образцы из местных очагов (соскоб уретры, цервикального канала, слюна). При этом нельзя забывать, что здоровый носитель может передать инфекцию другим людям. Кроме того, не исключена активация инфекционного процесса. В случаях, когда ПЦР дает положительный результат при исследовании крови, это уже нельзя считать носительством. Таким пациентам необходимо специфическое лечение заболевания вызванного обнаруженным возбудителем. Количественные показатели не имеют общих градаций. Их оценивает врач индивидуально для каждой конкретной инфекции. Количественный результат дает возможность определить насколько активна инфекция и выявить стадию процесса.

Достоверность ПЦР-метода

Для оценки эффективности методики есть три критерия:

- Точность – выявление инфекции (или ее отсутствия) с высокой степенью вероятности.

- Специфичность – точность определения конкретного возбудителя.

- Чувствительность – возможность идентификации возбудителя даже при малом количестве генетического материала в биологических образцах.

При использовании метода ПЦР получение ложноположительных результатов практически невозможно (то есть, если возбудитель отсутствует, то положительной проба не будет). Ложноотрицательный результат возможен, но такое происходит довольно редко. Подобные ситуации возникают, если инфекция на момент исследования неактивна. К примеру, хроническая инфекция вне активности или же латентная инфекция.

Анализ ПЦР: видео

Анализ ПЦР: расшифровка, как берут у мужчин и женщин

Высокоинформативный метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) дает возможность раннего выявления различных генетических и инфекционных болезней, протекающих остро или хронически. Причем

Подробно Анализ на ЗППП

Анализы на инфекции, передаваемые половым путем (ЗППП, ИППП), являются необходимой диагностической процедурой для выявления венерических заболеваний, которые обязательно надо лечить

Подробно Анализ секрета простаты

Анализ секрета простаты важный диагностический метод, который позволяет подтвердить такой диагноз, как простатит. В этой статье мы подробно расскажем как он проводится, какая подготовка

Подробно МАР-тест (положительный и отрицательный): что это такое, расшифровка результатов

Вероятность зачатия ребенка в одинаковой степени зависит и от женщины, и от мужчины. В последние годы отмечается рост количества семейных пар, которые не могут иметь детей из-за мужского

Подробно

Клиники и врачи

genitalhealth.ru

Анализ ПЦР у мужчин

Современные лабораторные исследования позволяют узнать полную информацию о состоянии здоровья человека. Одна из таких методик, позволяющая выявить наличие возбудителей различных заболеваний — ПЦР (полимеразная цепная реакция).  Суть анализа сводится к нахождению уникальных фрагментов ДНК и РНК, свойственных конкретным микроорганизмам.

ПЦР: преимущества метода

Анализ ПЦР имеет ряд преимуществ перед прочими методами диагностики:

Это интересно! ПЦР дает возможность проводить анализ одновременно на нескольких возбудителей.

При каких заболеваниях берут ПЦР?

Чаще всего анализ ПЦР у мужчин используется для диагностики следующих заболеваний.

Анализ позволяет определить наличие заболевания даже в латентной форме.  ПЦР используется для установления наличия определенного микроорганизма, в том числе выявления остаточных элементов после антибиотикотерапии. 

ПЦР мазок у мужчин: где сдать?

Сдать мазок ПЦР не очень просто – не каждая клиника может позволить себе дорогостоящее оборудование.

ПЦР – исследование, требующее применения высоких технологий, и персонал, специально обученный работе с аппаратурой. Поэтому оптимальным вариантом будет обращение в солидные лаборатории. Очень важна точность и современность оборудования, ведь иначе результат может оказаться ложным.

Как подготовиться к ПЦР?

Все зависит от того, какой материал забирается для исследования:

Как берут ПЦР у мужчин?

Мазок ПЦР у мужчин берётся из уретры, так как для выявления патологических процессов необходим биологический материал. Иногда для проведения исследования не требуется взятие мазка, анализ ПЦР у мужчин можно провести, исследуя мочу.

Пациент самостоятельно собирает в стерильную ёмкость первую порцию суточной мочи, предварительно совершив гигиенические процедуры. Затем анализ отправляется  в лабораторию. ПЦР анализ у мужчин берут в сетевых лабораториях, в государственных клиниках и в частных медицинских учреждениях. Наиболее точный и быстрый результат вы получите, если лаборатория расположена непосредственно в клинике.

Результат ПЦР у мужчин

После получения на руки результатов, не придется долго расшифровывать их при помощи справочников и Интернета. Бланк может содержать лишь два варианта ответа: положительный и отрицательный. Если результат ПЦР положительный, необходимо обследование у врача.

Время исследования может занять один день, в нашей лаборатории вы получите ответ за 20-30 минут.

При необходимости сдать на любую инфекцию методом ПЦР, обращайтесь в нашу клинику.

venerologiya.moscow

Метод ПЦР - как делается?

На сегодняшний день метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) - один из наиболее информативных и максимально точных способов определения инфекции в человеческом организме. В сравнении с другими анализами не имеет предела чувствительности, что позволяет обнаружить ДНК инфекционного агента и его природу.

ПЦР – принцип метода

Суть метода заключается в определении и многократном увеличении участка ДНК возбудителя в биологическом материале, полученном для исследования. Осуществляя, молекулярную диагностику методом ПЦР можно без труда расшифровать любые ДНК и РНК микроорганизмов. Так как каждый из них имеет свой уникальный генетический детектор, который при обнаружении идентичного фрагмента в биологическом образце, начинает процесс создания огромного количества копий. В связи с этим специфичность метода гарантирует точный результат, даже если в образце удалось обнаружить всего лишь один фрагмент ДНК инфекции.

Кроме того молекулярная диагностика методом ПЦР и ее последующая расшифровка предполагает выявление инфекционного агента еще в инкубационном периоде, когда клинические проявления заболевания отсутствуют.

Крайне важное условие для проведения ПЦР – это предварительная подготовка и правильный забор материала.

Метод ПЦР - как берется?

Одним из существенных преимуществ метода считается тот факт, что для исследования подходит абсолютно разный биологический материал. Это могут быть вагинальные выделения, мазки из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча или кровь. Все зависит от предполагаемого возбудителя и его места обитания.

Как правило, для определения половых инфекций методом ПЦР берутся выделения из половых органов, чтобы выявить вирусный гепатит С или ВИЧ делается забор крови.

В любом случае, врачи рекомендуют перед сдачей анализа:

Совершенно ясно, что ПЦР – это перспективный и высокотехнологичный метод исследования, прост в использовании, а также обладает высокими показателями чувствительности. Кроме практической медицины, полимеразная цепная реакция используется в научных целях.

Статьи по теме:

Большинство инфекционных заболеваний, передающихся половым путем, раньше врачи определять не умели, если эти болезни не проявляли себя целым букетом симптомов. Сегодня на службе медицины стоит метод ПЦР – от него не спрячется ни один вредоносный микроб.

В организме женщины содержится огромное количество гормонов, но для выявления различных отклонений и заболеваний сдаются лишь некоторые из них. Чаще всего это ФСГ – как и когда его сдают вы узнаете из этой статьи.

Все волнующиеся за свое здоровье женщины хотя бы раз в год должны проходить обязательные медосмотры. Одним из пунктов прохождения гинеколога является сдача анализов крови на гормоны. В частности, та проверяют содержание в организме такого гормона, как ФСГ.

Соотношение ЛГ и ФСГ - норма

Каждой женщине периодически необходимо сдавать такие анализы, как ЛГ и ФСГ. Их соотношение очень важно, так как врач может определить состояние гормонального здоровья пациентки. Это даже более информативно, чем абсолютные показатели этих гормонов в крови.

womanadvice.ru


Смотрите также