Определение билирубина в моче
Билирубин и уробилин в моче
Билирубин — основной конечный метаболит порфиринов, выделяемый из организма.
Билирубин в крови на присутствует в свободном виде — неконъюгированный (в соединении с альбумином).
Свободный (непрямой) билирубин не растворяется в воде и не появляется в моче. В печени он конъюгирует — соединяется с глюкуроновой кислотой и в этом виде выделяется с желчью в желудочно-кишечный тракт. Связанный (прямой) билирубин растворим в воде и при пороговой концентрации в крови более 3,4 мкмоль/л выделяется почками.
Билирубинурия бывает:
- при паренхиматозной (печеночной) желтухе (вирусный гепатит, хро нический гепатит, цирроз печени);
- при механической (подпеченочной, обтурационной) желтухе;
- в результате действия токсических веществ (алкоголя, органических соединений, инфекционных токсинов);
- при вторичной печеночной недостаточности (сердечная недостаточность, опухоли печени).
При нарушении синтеза гема в моче появляются промежуточные продукты синтеза порфиринового кольца и продукты распада гемоглобина:
- δ-аминолевулиновая кислота — в норме 2–3 мг/сут;
- порфобилиноген — до 2 мг/сут;
- уропорфирины — около 6 мг/сут;
- копропорфирины — около 70 мкг/сут;
- протопорфирины — около 12 мг/сут.
Порфиринурия (porphyrinuria) наблюдается при:
- отравлениях свинцом;
- апластических анемиях, циррозах печени, алкогольных интоксикациях, инфаркте миокарда, ревматизме;
- приеме лекарственных средств (барбитураты, органические соединения мышьяка).
Большинство качественных проб на билирубин основаны на превращении его в зеленоватый биливердин под действием окислителей (йода, азотной кислоты).
Проба Розина
Широко применяется ввиду доступности и простоты. Проба ставится с раствором Люголя (1 г йода, 2 г йодида калия и 300 мл дистиллированной воды) или 1% спиртовым раствором йода.
В пробирку наливают 3–4 мл мочи и осторожно наслаивают один из указанных реактивов. При наличии билирубина на границе между двумя жидкостями образуется зеленое кольцо.
Проба Розина недостоверна при гематурии, лечении антипирином.
Проба Фуше
Является одной из самых чувствительных, поэтому ее используют для контроля в сомнительных случаях.
К 10 мл мочи прибавляют 5 мл 15% раствора хлорида бария. Смешивают, фильтруют. Фильтр вынимают из воронки, расправляют на дне чашки Петри и наносят на него 2 капли реактива Фуше (25 г трихлоруксусной кислоты, 100 мл дистиллированной воды, 10 мл 10% раствора хлорного железа FeCl3 или 1 г хлорного железа FeCl3). При положительной реакции на фильтровальной бумаге появляются зелено-синие пятна.
Существует ряд «сухих» проб (качественных и полуколичественных («икто-тест»)) с использованием специальных таблеток.
Уробилиногеновые тела являются производными билирубина. Они представляют собой уробилиноген (мезобилирубиноген, і-уробилиноген, уробилиноген ІХа) и стеркобилиноген.
Уробилинурия
Уробилинурия (urobilinuria) — повышенное выделение с мочой уробилиногеновых (уробилиновых) тел.
Уробилинурия встречается при:
- паренхиматозных поражениях печени (гепатиты, цирроз печени);
- гемолитических анемиях;
- заболеваниях кишечника (энтериты, колиты, кишечная непроходимость);
- отравлении свинцом.
Уробилиновые тела не поступают в мочу при механической желтухе.
Согласно современным представлениям, образование уробилино гена из прямого билирубина происходит в верхних отделах кишечника (тонкого и начале толстого) под действием кишечных бактерий. Часть уробилиногена резорбируется через кишечную стенку и с кровью портальной системы переносится в печень, где расщепляется полностью, т. е. в общий кровоток и, следовательно, в мочу не попа дает. Нерезорбированный уробилиноген подвергается дальнейшему воздействию кишечных бактерий, превращаясь в стеркобилиноген. Небольшая часть стеркобилиногена резорбируется и через портальную вену попадает в печень, где расщепляется подобно уробили но гену. Часть стеркобилиногена через геморроидальные вены всасывается в общий кровоток и почками выделяется в мочу. Наибольшая часть в нижних отделах толстого кишечника превращается в стеркобилин и выводится с калом, являясь его нормальным пигментом.
Для определения уробилиногеновых тел в моче применяют пробу Нейбауэра, для определения уробилиновых тел — пробы Флоранса, Богомолова и др. Обычно в лаборатории имеют дело с постоявшей мочой, поэтому практическое значение имеют вторые пробы.
Проба Богомолова (с сульфатом меди)
К 10–15 мл нефильтрованной мочи приливают 2–3 мл насыщенного раствора сульфата меди (23 г CuSO4 · 5h3O растворяют в 100 мл дистиллированной воды). Если образуется помутнение, то прибавляют несколько капель концентрированной серной кислоты до прояснения раствора. Через 5 мин приливают 2–3 мл хлороформа и осторожно перемешивают полученную смесь, покачивая пробирку. Если концентрация уробилина в моче выше нормальной, то хлороформ, экстрагируя уробилин, оседает на дно и окрашивается в розовый цвет.
Проба Флоранса (с хлористоводородной кислотой)
К 8–10 мл мочи, подкисленной 8–10 каплями концентрированной серной кислоты, приливают 2–3 мл диэтилового эфира, осторожно перемешивают. Эфирный слой отбирают и наслаивают в другую пробирку, содержащую 2–3 мл концентрированной хлористоводородной кислоты. Образование розового кольца на границе жидкостей свидетельствует о наличии уробилина. Интенсивность окраски пропорциональна количеству уробилина.
Эта проба высокочувствительна, дает положительный результат даже при нормальном содержании уробилина в моче. Поэтому с помощью пробы Флоранса можно установить факт полного отсутствия в моче уробилиновых тел.
Жив ли Христос? Воскрес ли Христос из мертвых? Исследователи изучают факты
dyagnoz.ru
Билирубин в моче
Билирубин в моче бывает только при определенных патологических состояниях, протекающих с желтухой. Желчный пигмент не фильтруется в клубочках почек, а попадает в мочу из-за выделения канальцами. Билирубин в моче появляется, когда билирубинемия больше 2 мг%, а концентрация прямого билирубина—1 мг%. Есть мнение, что в течение острого гепатита изменяется «почечный порог» выделения билирубина (понижается в начале заболевания и повышается в период выздоровления).
Определение билирубина в моче
Используемая обычно простая ориентировочная проба на присутствие билирубина в моче основано на том, что его присутствие придает моче насыщенно-желтый цвет (цвет пива), и образующаяся при взбалтывании пена имеет желтоватый цвет.
Существуют различные пробы на присутствие билирубина в моче.
- Проба с раствором Люголя или проба 1 % спиртовым раствором йода (проба Розина). Производится наслаивание на мочу любого из этих двух растворов. Проба положительная, если в месте соприкосновения двух жидкостей возникает зеленое кольцо.
- Проба Гмелина со смесью азотной кислоты и азотистой кислоты. При положительной реакции нанесение капли этой смеси на фильтр, через который фильтровалась исследуемая моча, дает зеленое кольцо. Эта проба не настолько чувствительна, чем первая.
- Проба с реактивом Фуше (смесь 25% раствора трихлоруксусной кислоты и 10% полуторахлористого железа). При положительной реакции возникает сине-зеленое окрашивание. Из всех перечисленных эта проба наиболее чувствительна.
- Видоизмененная проба с реактивом Фуше (проба Таррисона). Реакцию считают положительной, если появляется зеленое окрашивание. По степени интенсивности окраски можно оценить количество билирубина в миллиграмм-процентах. Преимущество метода в том, что он может быть использован при и и малом содержании билирубина в моче.
- Реакция с метиленовой синькой. К 10 мл мочи прибавляют 2 капли метиленовой сини. Результат считают положительным, если появится светло-зеленое пятно. Проба не специфична для билирубина.
Желчный пигмент появляется в моче при увеличенной билирубинемии с прямой реакцией, т. е. при печеночных желтухах и подпеченочных желтухах. А гемолитические желтухи не сопровождаются выделением его с мочой, так как непрямая фракция билирубина связана с белком и не проходит через почки.
Видео:
surgeryzone.net
Определение билирубин в моче
Моча здоровых людей содержит минимальные количества билирубина, которые не обнаруживаются качественными пробами, применяемыми в практике.
Большинство из них основано на превращении билирубина под действием окислителей в зеленый биливердин или пурпурно-красные билипуррины, которые в смеси с биливердином дают синее окрашивание.
Унифицированная проба Фуше
Реактивы: 1) 15% раствор хлорида бария (ВаСl2); 2) реактив Фуше: 25 г ТХУ растворяют в 100 мл дистиллированной воды и приливают 10 мл 10 % раствора хлорида железа (III) (FeCl3).
Ход определения. В пробирку наливают 10 мл мочи, добавляют 5 мл 15% раствора хлорида бария, смешивают, фильтруют. На вынутый из воронки фильтр, предварительно расправленный в чашке Петри, наносят 2 капли реактива Фуше.
Оценка результатов. При наличии в моче билирубина на фильтре появятся сине-зеленые пятна.
Примечание. Щелочную мочу предварительно подкисляют несколькими каплями уксусной кислоты.
Унифицированная проба Розина
Реактив. 1 % спиртовой раствор йода.
Ход определения. В пробирку наливают 4–5 мл мочи и по стенкам осторожно наслаивают раствор йода. О наличии билирубина свидетельствует появление на границе между жидкостями зеленого кольца.
Проба Готфрида
Принцип метода. Глюкурониды билирубина при реакции с диазотированной сульфаниловой кислотой (диазобензосульфоновая кислота) дают розовую окраску за счет образования билирубина.
Реактивы. 1) 10% раствор хлорида бария (ВаСl2); 2) диазореактив: а) реактив 1: 5 г сульфаниловой кислоты растворяют в небольшом количестве воды, прибавляют 15 мл концентрированной соляной кислоты (НСl) и доводят дистиллированной водой до 1 л; б) реактив 2: 0,5% раствор нитрата натрия (NaNO3). Непосредственно перед исследованием 10 мл раствора 1 смешивают с 0,25 мл раствора 2; 3) 96% этиловый спирт; 4) 6% раствор гидрофосфата натрия (Na2HPO4).
Ход определения. В пробирку вносят 10 мл мочи, подкисляют несколькими каплями уксусной кислоты, прибавляют 5 мл 10% раствора хлорида бария, фильтруют через бумажный фильтр. Фильтр раскладывают на дне чашки Петри и на осадок наносят 1–2 капли диазореактива, 4 капли спирта и 1 каплю гидрофосфата натрия.
Оценка результатов. При наличии в моче билирубина осадок окрашивается в красно-фиолетовый цвет.
Принцип определения билирубина, описанный в пробе Готфрида, взят за основу в экспресс-тестах, выпускаемых рядом зарубежных фирм.
Клиническое значение. Билирубинурия наблюдается главным образом при поражении паренхимы печени (паренхиматозные желтухи) и при механических затруднениях оттока желчи (обтурационные, механические желтухи), сопровождающихся увеличением содержания билирубина в крови. При гемолитической желтухе реакция на билирубин в моче отрицательна, что имеет диагностическое значение при дифференциальной диагностике желтух.
onlab.info
Билирубин в моче
В норме билирубин в моче не определяется, поскольку неконъюгированный билирубин нерастворим вводе и не выделяется почками.
Конъюгированный билирубин через билиарный полюс гепатоцита экскретируется в кишечник, где восстанавливается под действием дегидрогеназ микробной флоры кишечника в уробилиногеновые тела. В кишечнике последовательно образуются Д-уробилиноген, И-уробилиноген и Л-уробилиноген. Большая часть Д- и И-уробилиногена, образовавшаяся в верхних отделах толстой кишки, всасывается кишечной стенкой и по воротной вене вновь попадает в печень, где распадается, а продукты этого распада вновь выделяются в кишечник и, по-видимому, вовлекаются в реакции синтеза гемоглобина. Фракция Л-уробилиногена (стеркобилиноген), образовавшегося в нижних отделах кишечника, частично попадает через нижние геморроидальные вены в общий крут кровообращения и может выделяться с мочой в виде уробилина; большая же часть в виде стеркобилина выделяется с калом, окрашивая его.
У детей первых месяцев жизни в связи с отсутствием гнилостных процессов в толстой кишке стеркобилин не образуется, и конъюгированный билирубин выделяется в неизмененном виде.
Известно, что небольшое количество конъюгированного билирубина в кишечнике под влиянием бета-глюкуронидазы гидролизируется в не конъюгированный и реабсорбируется по кишечно-печеночному пути в печень (enterohepatic circulation).
При высоком уровне свободного билирубина плазмы и низкой почечной экскреции градиент для свободного билирубина, содержащегося в плазме, к его количеству в кишечнике выше, и потому у новорожденных значительное количество свободного билирубина может быть выделено путем диффузии через кишечник.
ilive.com.ua
