Непрямой и прямой билирубин биохимия


Билирубин и его фракции

Для исследования общего билирубина и его фракций применяются:

1. Прямые спектрофотометрические методы, основаны на измерении абсорбции билирубина при 440‑460 нм, источником ошибок здесь является интерференция желтых небилирубиновых пигментов;

2. Ферментативные методы, основаны на окислении пигмента медьсодержащим ферментом билирубиноксидазой (КФ 1.3.3.5.), с образованием биливердина и исчезновением абсорбции при 460 нм. Методы этой группы точны и отличаются высокой специфичностью и чувствительностью;

3. Колориметрические диазометоды, базируются на взаимодействии билирубина с диазотированной сульфаниловой кислотой с образованием азопигментов. Под воздействием кислоты разрывается тетрапирроловая структура билирубина с образованием двух дипирролов, углеродные атомы метиленовых групп вступают в прямую реакцию с диазотированной сульфоновой кислотой (диазосмесь) с образованием розово-фиолетовых изомеров азодипиррола с максимумом поглощения при 530 нм. Связанный билирубин реагирует быстро, несвязанный –– только после добавления акселератора (кофеин, метанол, мочевина, бензоат или гидроокись натрия, уксусная кислота и другие). Последний освобождает билирубин из комплекса с белками и тем самым ускоряет реакцию азосочетания. Образовавшийся азокраситель ведет себя как кислотно-основной индикатор с несколькими цветными переходами: в сильнокислой среде он окрашен в фиолетовый цвет, в слабощелочной и слабокислой — в розовый, в сильнощелочной среде — в синий или зеленый цвета.

4. Электрохимические методы с использованием платинового и ртутного электродов;

5. Хроматографическое разделение отдельных фракций билирубина;

6. Флюорометрические методы, используется свойство свободного билирубина после поглощения при 430 нм испускать свет длиной 520 нм. Позволяют определить концентрацию неконъюгированного билирубина и, после обработки детергентом, общего билирубина главным преимуществом метода является возможность использовать микроколичества сыворотки.

Унифицированным методом определения количества билирубина в сыворотке является метод Йендрашика‑Клеггорна‑Грофа по диазореакции в щелочной или слабокислой среде в присутствии акселератора.

Определение концентрации билирубина и его фракций в сыворотке крови по диазореакции

Принцип

Билирубин взаимодействует с диазотированной сульфоновой кислотой в присутствии кофеина с образованием окрашенных азопигментов.

Нормальные величины

Сыворотка (диазореакция) Прямой билирубин
Взрослые     2,2‑5,1 мкмоль/л
  Общий билирубин
Дети   Доношенные Недоношенные
  кровь из пуповины < 34,2 мкмоль/л < 34,2 мкмоль/л
  возраст до 2 дней < 136,8 мкмоль/л < 205,2 мкмоль/л
  возраст до 5 дней < 205,2 мкмоль/л < 273,6 мкмоль/л
  впоследствии 3,4‑17,1 мкмоль/л  
Взрослые     8,5‑20,5 мкмоль/л
Моча(диазореакция на диагностических полосках или таблетках) отсутствие билирубина
Амниотическая жидкость (метод окисления)   28 нед

biokhimija.ru

Билирубин и его фракции (общий, прямой, непрямой)

Билирубин и его фракции (общий, прямой, непрямой)

Анализ, в ходе которого определяется содержание в крови желчных пигментов и их фракций. Они являются метаболитами распада гемоглобина, и их уровень повышается при усиленном разрушении эритроцитов, нарушении функции печени и желчевыводящих путей.

Результаты исследований выдаются с бесплатным комментарием врача.

Метод исследования

Колориметрический фотометрический метод.

Единицы измерения

Мкмоль/л (микромоль на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную, капиллярную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не принимать пищу в течение 12 часов до анализа.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение за 30 минут до анализа.
  • Не курить в течение 30 минут до анализа.

Общая информация об исследовании

Билирубин – желтый пигмент, который является компонентом желчи и образуется в селезенке и костном мозге при распаде эритроцитов. В норме эритроциты разрушаются через 110-120 дней после выхода из костного мозга. При этом из погибших клеток высвобождается металлопротеин гемоглобин, состоящий из железосодержащей части – гема и белкового компонента – глобина. От гема отщепляется железо, которое повторно используется в качестве необходимого компонента ферментов и других белковых структур, а гемовые белки превращаются в билирубин. Непрямой (неконъюгированный) билирубин с помощью альбуминов доставляется кровью в печень, где благодаря ферменту глюкуронилтрансферазе соединяется с глюкуроновой кислотой и образует прямой (конъюгированный) билирубин. Процесс превращения водонерастворимого билирубина в водорастворимый называется конъюгацией. Связанная фракция пигмента практически не поступает в кровь и в норме экскретируется с желчью. Билирубин в просвете кишечника под действием бактерий кишечника метаболизируется и выводится с калом, придавая ему темную окраску.

Прямой билирубин назван так в связи с методикой лабораторного исследования. Данный водорастворимый пигмент непосредственно взаимодействует с реактивами (диазореактивом Эрлиха), добавленными в пробу крови. Неконъюгированный (непрямой, свободный) билирубин нерастворим в воде, и для его определения необходимы дополнительные реактивы.

В норме за сутки в человеческом организме вырабатывается 250-350 мг билирубина. Выработка более 30-35 мкмоль/л проявляется желтушностью кожных покровов и склер. По механизму развития желтухи и преобладанию фракций билирубина в крови выделяют надпеченочную (гемолитическую), печеночную (паренхиматозную) или подпеченочную (механическую, обтурационную) желтуху.

При повышенном разрушении эритроцитов (гемолизе) или нарушенном захвате печенью желчного пигмента увеличивается содержание билирубина за счет неконъюгированной фракции без повышения уровня связанного пигмента (надпеченочная желтуха). Данная клиническая ситуация наблюдается при некоторых врожденных состояниях, связанных с нарушением конъюгации билирубина, например при синдроме Жильбера.

При наличии преграды на пути выхода желчи в двенадцатиперстную кишку или нарушениях желчевыделения в крови повышается прямой билирубин, что нередко является признаком обтурационной (механической) желтухи. При обструкции желчевыводящих путей прямой билирубин попадает в кровь, а затем и в мочу. Он является единственной фракцией билирубина, способной выделяться почками и окрашивать мочу в темный цвет.

Увеличение билирубина за счет прямой и непрямой фракции указывает на заболевание печени с нарушением захвата и выделения желчных пигментов.

Повышение непрямого билирубина нередко наблюдается у новорожденных в первые 3 дня жизни. Физиологическая желтуха связана с повышенным распадом эритроцитов с фетальным гемоглобином и недостаточной зрелостью ферментных систем печени. При затянувшейся желтухе у новорожденных необходимо исключать гемолитическую болезнь и врожденную патологию печени и желчевыводящих путей. При конфликте групп крови матери и ребенка возникает повышенный распад эритроцитов малыша, что приводит к повышению непрямого билирубина. Неконъюгированный билирубин обладает токсическим действием на клетки нервной системы и может привести к повреждению головного мозга новорожденного. Гемолитическая болезнь новорожденных требует немедленного лечения.

У 1 из 10 тысяч младенцев выявляется атрезия желчевыводящих путей. Данная угрожающая жизни ребенка патология сопровождается повышением билирубина за счет прямой фракции и требует срочного хирургического вмешательства и в некоторых случаях трансплантации печени. У новорожденных также существует вероятность наличия гепатита с повышением как прямого, так и непрямого билирубина.

Изменения уровня фракций билирубина в крови с учетом клинической картины позволяют оценить возможные причины желтухи и определиться с дальнейшей тактикой обследования и лечения.

Для чего используется исследование?

  • Для дифференциальной диагностики состояний, сопровождающихся желтушностью кожных покровов и склер.
  • Для оценки степени гипербилирубинемии.
  • Для дифференциальной диагностики желтух новорожденных и выявления риска развития билирубиновой энцефалопатии.
  • Для диагностики гемолитической анемии.
  • Для исследования функционального состояния печени.
  • Для диагностики нарушений оттока желчи.
  • Для наблюдения за пациентом, принимающим препараты с гепатотоксическими и/или гемолитическими свойствами.
  • Для динамического наблюдения за пациентами с гемолитической анемией или патологией печени и желчевыводящих путей.

Когда назначается анализ?

  • При клинических признаках патологии печени и желчевыводящих путей (желтуха, потемнение мочи, обесцвечивание стула, зуд кожных покровов, тяжесть и боли в правом подреберье).
  • При обследовании новорожденных с выраженной и затянувшейся желтухой.
  • При подозрении на гемолитическую анемию.
  • При обследовании пациентов, регулярно употребляющих алкоголь.
  • При использовании лекарственных препаратов с вероятным гепатотоксическим и/или гемолитическим побочным действием.
  • При инфицировании вирусами гепатитов.
  • При наличии хронических заболеваний печени (цирроз, гепатит, холецистит, желчнокаменная болезнь).
  • При комплексном профилактическом обследовании пациента.

Что означают результаты?

Референсные значения

Возраст

Референсные значения

Меньше 2 дней

58 - 197 мкмоль/л

2-6 дней

26 - 205 мкмоль/л

6-30 дней

5 - 21 мкмоль/л

Больше месяца

5 - 21 мкмоль/л

  • Прямой билирубин: 0 - 5 мкмоль/л.
  • Непрямой билирубин – расчетный показатель.

Причины повышения уровня общего билирубина

1. Преимущественно за счет непрямого билирубина (непрямая гипербилирубинемия, связанная с избыточным гемолизом или нарушением захвата и связывания свободного билирубина печенью)

  • Аутоиммунный гемолиз.
  • Гемолитическая анемия.
  • Пернициозная анемия.
  • Серповидно-клеточная анемия.
  • Врожденный микросфероцитоз.
  • Талассемия.
  • Эмбриональный тип кроветворения.
  • Синдром Жильбера.
  • Синдром Криглера – Найяра.
  • Постгемотрансфузионная реакция.
  • Переливание несовместимых групп крови.
  • Малярия.
  • Инфаркт миокарда.
  • Сепсис.
  • Геморрагический инфаркт легкого.
  • Кровоизлияние в ткани.

2. Преимущественно за счет прямого билирубина (прямая гипербилирубинемия, связанная с билиарной обструкцией или нарушением выделения связанного билирубина печенью)

  • Холедохолитиаз.
  • Желчнокаменная болезнь.
  • Вирусный гепатит.
  • Склерозирующий холангит.
  • Билиарный цирроз печени.
  • Рак головки поджелудочной железы.
  • Синдром Дабина – Джонсона.
  • Синдром Ротора.
  • Атрезия желчевыводящих путей.
  • Алкогольная болезнь печени.
  • Беременность.

3. За счет прямого и непрямого билирубина (паренхиматозная желтуха с нарушением захвата билирубина и выделения желчи)

  • Вирусный гепатит.
  • Алкогольная болезнь печени.
  • Цирроз.
  • Инфекционный мононуклеоз.
  • Токсический гепатит.
  • Эхинококкоз печени.
  • Абсцессы печени.
  • Метастазы или массивные опухоли печени.

Что может влиять на результат?

  • Внутривенное введение контрастного препарата за 24 часа до анализа искажает результат.
  • Воздействие солнечных лучей или искусственного света в течение 1 часа и более, употребление жирной пищи снижает содержание билирубина в образце.
  • Длительное голодание, интенсивные физические нагрузки способствуют повышению уровня билирубина.
  • Никотиновая кислота и атазанавир увеличивают содержание непрямого билирубина.
  • Лекарственные препараты, повышающие уровень общего билирубина: аллопуринол, анаболические стероиды, противомалярийные препараты, аскорбиновая кислота, азатиоприн, хлорпропамид, холинергические препараты, кодеин, декстран, диуретики, эпинефрин, изопротеренол, леводопа, ингибиторы моноаминооксигеназы, меперидин, метилдопа, метотрексат, морфин, пероральные контрацептивы, феназопиридин, фенотиазиды, хинидин, рифампин, стрептомицин, теофиллин, тирозин, витамин А.
  • Лекарственные препараты, снижающие общий билирубин: амикацин, барбитураты, вальпроевая кислота, кофеин, хлорин, цитрат, кортикостероиды, этанол, пенициллин, протеин, противосудорожные, салицилаты, сульфаниламиды, урсодиол, мочевина.

Важные замечания

  • Непрямой билирубин обладает нейротоксическим действием у детей в первые 2-4 недели жизни. У детей старших возрастных групп и взрослых гемато-энцефалический барьер обеспечивает достаточную защиту от неконъюгированого билирубина.
  • Любое повышение билирубина требует уточнения его причины и обследования пациента.
  • Степень повышения билирубина не всегда зависит от тяжести патологического процесса.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Терапевт, гастроэнтеролог, гепатолог, гематолог, педиатр, хирург, врач общей практики.

Литература

  • Назаренко Г. И., Кишкун А. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. – М.: Медицина, 2000. – 157-161.
  • Fischbach F.T., Dunning M.B. A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, 8th Ed. Lippincott Williams & Wilkins, 2008: 1344 p.
  • Wilson D. McGraw-Hill Manual of Laboratory and Diagnostic Tests 1st Ed. Normal, Illinois, 2007: 666 p.

www.helix.ru

Билирубин непрямой или неконъюгированный билирубин, норма

Содержание

Неконъюгированный билирубин, или непрямой – одна из составных частей билирубина, цветного пигмента, который производится костным мозгом и в селезенке, и обнаруживается в желчи. Билирубин производится в ходе естественного разрушения кровяных телец – эритроцитов, которые существуют, в среднем примерно 110 дней. Помимо непрямого, различают также прямой билирубин. Их отличие – в химической форме: непрямой билирубин не растворяется водой, по этой причине для вывода его из организма требуется метаболическое преобразование. Оно происходит в печени, которая преобразует непрямую форму вещества в растворимый вид — прямой билирубин. Каковы нормы содержания непрямого пигмента, почему происходят отклонения от них, и к чему это может привести?

Определение билирубина и примерные показатели нормы

Как упомянуто ранее, билирубин непрямой – промежуточная стадия метаболизма пигмента, которая нерастворима в воде. Обладает определенным токсическим влиянием на ткани организма человека, поэтому в крови его концентрация должна быть минимальной. Непрямая разновидность в клетках печени преобразуется в свой растворимый вид – прямой, а сам процесс носит название конъюгации. В связи с этим непрямую разновидность вещества называют еще и свободной, или неконъюгированной.

Исторически термины «непрямой» и «прямой» билирубин имеют происхождение от тех методик, с помощью которых они обнаруживаются. Если проба крови исследуется на прямую разновидность – достаточно провести реакцию Эрлиха, содержащийся в крови билирубин реагирует со специальным реактивом. Чтобы определить наличие неконъюгированного, требуется ряд более сложных операций, то есть определяется он непрямыми способами – отсюда и происходит название.

Уровень, на котором находится свободный билирубин, не имеет четкой связи с расстройствами гормональной сферы или полом, нормативы его содержания в крови у женщин и представителей сильного пола примерно одинаковы. Имеется лишь определенная зависимость от возраста обследуемого: чем младше ребенок, тем больше у него в крови сконцентрировано билирубина.

Показатели уровня непрямого вещества высчитываются на основе разницы между общей концентрацией обоих форм вещества, и уровнем содержания связанного пигмента. Обычно за норму принято брать показатель около 19 мкмоль/литр. Для правильной оценки результатов анализа необходимо знать также, какова норма билирубина для всех его видов, включая и общий.

Так, например, для новорожденных параметр общего билирубина равен:

  • в возрасте до 2 дней — от 27 до 198 мкмоль/л;
  • до 6 суток – от 25 до 206 мкмоль/л;
  • после 6 дней – от 5 до 21 мкмоль/л.

Показатель связанного пигмента у таких малышей не должен быть выше 5 мкмоль/л, а уровень непрямого вычисляется по формуле «общий вычесть пять», и также не должен выходить за пределы полученной цифры.

Рост концентрации нерастворимого билирубина в крови вызывается различными заболеваниями. Их принято разделять по тем системам и отдельным органам, которые они поражают.

Первая группа – болезни кровеносной системы. Рост уровня неконъюгированного пигмента характерен для процесса массового распада эритроцитов. При их гибели в кровь попадает так называемый гемовый белок, который становится нерастворимой фракцией билирубина. Такая ситуация характерна для пациентов, больных анемией и различными формами малокровия, которые сопровождаются нехваткой гемоглобина. Организм пытается восполнить эту недостачу, разрушая собственные кровяные клетки.

Данный процесс далеко не всегда указывает на болезни печени, этот орган может быть совершенно в порядке, метаболизируя пигмент в штатном режиме. Но, поскольку объемы приходящего на переработку пигмента очень велики, орган не успевает обработать его весь, что приводит к росту концентрации билирубина. В случае если рост продолжится, то данная патология, носящая также имя «гемолитическая анемия», перейдет в желтуху гемолитического генеза.

К признакам этой болезни относят:

  • бледность кожи;
  • общую слабость;
  • испытываемое пациентом головокружение;
  • рост непрямого пигмента и ретикулоцитов в анализах, снижение гемоглобина, при этом с нормальными показателями прямого пигмента;
  • увеличение селезенки в размерах;
  • в анализе мочи обнаруживается значительное повышение уробилиногена.

Проблема анемии может быть и приобретенной, и иметь врожденный характер.

Среди прочих причин повышения концентрации пигмента, связанных с болезнями кровеносной системы, можно отметить такие тяжелые инфекции, как малярия, вызванный болезненными процессами сепсис и многое другое. Может оказывать влияние и прием медикаментов, а также отравление некоторыми ядами – опасным мышьяком, солями меди, свинцом и прочим. У некоторых новорожденных может наблюдаться гемолитическая патология, полученная в период внутриутробного развития, которой также сопутствует аномальный уровень билирубина.

Ко второй группе относятся печеночные патологии. Кровеносная система может находиться в полном порядке, но непрямой пигмент, несмотря на это, аномально высок. С большой долей вероятности это говорит о дисфункции печени, которая не может преобразовать его в растворимую, пригодную для вывода из организма, форму. Продолжающий производиться несвязанный пигмент скапливается в тканях и кровотоке.

Причин, приводящих к такой патологии, относительно немного, в их числе:

  1. Т. н. синдром Жильбера. Это генетическая болезнь, проявляющаяся в аномальном синтезе глюкуронилтрансферазы – важного фермента, который участвует в преобразовании билирубина. Чаще всего диагностируется у подростков, со временем сглаживается и к 50 годам совершенно проходит.
  2. Синдром Найяра-Криглера. Наблюдается он у новорожденных и проявляется в виде тяжелой желтухи. При нем у появившегося на свет младенца в печени либо частично, либо совсем отсутствует названный выше фермент.
  3. Синдром Люси-Дрисколла. Наблюдается у грудничков на естественном вскармливании. Вызывается он присутствием в материнском молоке гормона, который блокирует синтез в организме младенца глюкуронилтрансферазы.
  4. Желтухи приобретенного характера, негемолитические. Их вызывает, к примеру, прием определенных лекарств, которые метаболизируются теми же клетками, которые обрабатывают непрямую форму, вытесняя ее из печени. Как следствие – происходит рост ее концентрации в крови. К таким средствам относятся некоторые контрацептивы, медикаменты, содержащие морфин и другие.

Третья группа – проблемы с желчным пузырем. Поскольку билирубин – вещество желчного происхождения, большой его объем сконцентрирован в данном органе. Когда вывод желчи по какой-то причине нарушается, растет и уровень несвязанного вещества.

Эффект роста неконъюгированного пигмента вызывает поражение некоторыми видами паразитов человека, заболевания аутоиммунного характера, а также дефицит витаминов группы B, особенно B12.

Почему билирубин снижается?

Падение уровня пигмента происходит на фоне снижения концентрации эритроцитов, ведь образуется он именно в результате гемолиза этих телец.

Падение непрямого имеет меньшее диагностическое значение, в сравнении с высоким его уровнем, но также может сигнализировать о различных патологиях:

  • лейкозе;
  • почечной недостаточности;
  • общем истощении;
  • туберкулезе.

Нередки ситуации, когда понижение диагностируется ошибочно.

Чтобы минимизировать вероятность получения ложного результата, необходимо проводить забор крови у пациента рано утром, натощак, при этом человек не должен испытывать стресс или эмоциональное напряжение, а также подвергаться физическим нагрузкам.

Оценить статью:

Рекомендуем прочитать:

boleznikrovi.com


Смотрите также