Анализ кала на хеликобактер


Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Выявление Helicobacter pylori (H. pylori), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в образце кала.

Синонимы русские

Хеликобактер [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени].

Синонимы английские

H. pylori, Helicobacter pyloridis, DNA [real-time polymerase chain reaction, RT-PCR, quantitative RT-PCR, qPCR, qRT-PCR].

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

H. pylori – это грамотрицательная подвижная бактерия, устойчивая к воздействию соляной кислоты и способная колонизировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Как правило, первичное инфицирование происходит в детстве и протекает бессимптомно, но у некоторых людей с течением времени приводит к развитию серьезных заболеваний. H. pylori обнаруживается в подавляющем большинстве случаев гастрита и язвенной болезни и, кроме того, многократно увеличивает риск развития аденокарциномы и В-клеточной лимфомы желудка. Современная диагностика этих заболеваний невозможна без точной и быстрой идентификации H. pylori.

H. pylori может быть выявлена с помощью нескольких методов. В настоящее время доступны неинвазивные методы диагностики, обладающие преимуществом простоты и безопасности взятия образца для исследования (исследование кала), что имеет особое значение при обследовании пожилых людей, детей, а также в условиях амбулатории.

Helicobacter очень чувствительна к воздействию желчных кислот и пониженного содержания кислорода, поэтому при пассаже химуса через двенадцатиперстную и толстую кишку количество бактерий значительно снижается. Кроме того, активные спиралевидные формы бактерии претерпевают морфологические изменения, обеспечивающие большую устойчивость в неблагоприятных условиях. Результатом этого становится низкая концентрация микроорганизмов и преобладание кокковых форм в кале, что следует учитывать при выборе лабораторного метода исследования этого биоматериала. Среди многих неинвазивных методов особое место занимает исследование с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Полимеразная цепная реакция в реальном времени (РТ-ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в кале) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. РТ-ПЦР характеризуется очень высокой чувствительностью (93-95 %), что является преимуществом при анализе кала. В отличие от бактериологического посева, это исследование позволяет выявлять как спиралевидные, так и кокковые (некультивируемые) формы H. pylori. Из-за того что в реакции выявляется ДНК микроорганизма, исследование не применяется для дифференциальной диагностики текущей инфекции или инфекции в анамнезе – результат анализа будет положительным еще некоторое время после полной эрадикации H. pylori, что обусловлено выявлением фрагментов разрушенных ДНК микроорганизма.

На слизистой оболочке желудка могут также присутствовать другие представители рода Helicobacter (H. suis, H. baculiformis). Несмотря на то что их значение в развитии заболеваний ЖКТ еще до конца не установлено, они играют определенную роль при идентификации H. pylori. Так, например, лабораторные исследования, основанные на выявлении общего для всех видов Helicobacter антигена, будут характеризоваться большим числом ложноположительных результатов исследования на H. pylori за счет выявления других видов (как в случае с ELISA). Это практически исключено в исследовании с помощью РТ-ПЦР, так как реакция основана на выявлении специфического для H. pylori фрагмента ДНК.

Диагностика хеликобактериоза у детей представляет определенные трудности. Это связано с невыполнением ребенком дыхательного маневра при использовании уреазного дыхательного теста, а также необходимостью наркоза при использовании инвазивных методов. Исследование кала с помощью РТ-ПЦР является хорошей альтернативой этим методам и поэтому может быть с успехом применено в педиатрической практике.

Высокое содержание неорганических солей (фосфатов, кальция), ферментов ЖКТ, полисахаридов, желчных кислот и солей, растительных волокон, слизи и других компонентов кала может ингибировать РТ-ПЦР, поэтому подготовка к тесту требует должного внимания со стороны пациента и врача. Интерпретация результата анализа проводится с учетом дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики заболеваний, вызванных H. pylori:

Когда назначается исследование?

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат:

Отрицательный результат:

Что может влиять на результат?

Важные замечания

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, педиатр, врач общей практики.

Литература

www.helix.ru

Расшифровка анализов на бактерию хеликобактер пилори

Сложно найти человека, который никогда не испытывал чувство дискомфорта в желудке, тошноту, изжогу. Причин для появления таких симптомов множество и одной из них является бактерия хеликобактер пилори (Helicobacter Pylori). Микроорганизм присутствует в организме почти у 90% людей, но не у всех проявляются признаки заболеваний пищеварительного тракта. При появлении симптоматики, свидетельствующей о гастроэнтерологических расстройствах, врач назначает анализ на возбудитель хеликобактер пилори, что позволяет подтвердить или исключить его наличие у пациента.

Особенности бактерии

Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) называется бактерия в форме спирали. Микроорганизм способен инфицировать органы пищеварительной системы. Бактерия служит провокатором для развития таких гастроэнтерологических патологий, как гастрит, гастродуоденит, язва желудка и двенадцатиперстной кишки, рак и лимфома желудка. Helicobacter pylori способна проникать в организм через: загрязненную посуду и воду, слюну, слизь, мокроту. Заражение происходит при обычном бытовом контакте с носителем бактерии.

После заражения, микроорганизм продолжительный период не вызывает никаких симптомов. По статистике около 90% населения являются носителями бактерии, но большинство даже и не подозревают о ее наличии. Проявляется Helicobacter pylori при снижении защитной функции организма. Такое нарушение происходит при нервных перенапряжениях и стрессах, травмах, вирусных инфекциях, гормональных сбоях, общих интоксикациях организма, ожоговых состояниях, обезвоживании, обильных кровотечениях.

Пациент может безрезультатно лечить какое-либо заболевание, а после тщательного обследования выясняется, что причина патологии кроется в бактерии хеликобактер пилори. Helicobacter pylori от иных вирусов отличает то, что она не погибает в результате воздействия желудочного сока. Разрушительное действие микроорганизм оказывает путем выработки аммиака. Проникая в слизистые оболочки, бактерия начинает активно разрушать клетки. В результате такого губительного воздействия образуются язвы и воспаления.

Показания для проведения анализа

Врачи настоятельно рекомендуют пациентам сдавать анализы в целях профилактики и контроля за состоянием здоровья даже без симптомов заболеваний. Большинство людей пренебрегают обследованиями и обращаются в больницу лишь при появлении расстройства самочувствия. Врачи направляют пациентов сдать анализ на хеликобактер пилори при следующих симптомах:

Затруднительно определить симптомы заражения, если пациентом является ребенок. Дети не всегда могут точно объяснить, в каком месте болит и насколько сильно. В данном случае нужно обратить внимание на поведение и движения ребенка. Если малыш прикладывает руку к животу в области эпигастрии, то вероятнее всего боль сосредоточена именно в этом месте. Также нужно обращать внимание на аппетит и общее самочувствие ребенка. При наличии симптоматики заболеваний желудка, нужно обратиться к врачу, пройти обследование и провести анализ на хеликобактер.

Уреазный дыхательный тест

В медицинской практике используют различные методы диагностики бактерии Helicobacter pylori. Одним из таких исследований является уреазный дыхательный тест. Для проведения анализа требуется специальная подготовка. Главное требование — отказ от еды не менее чем за 8 часов до исследования. Тест проходят строго натощак в дообеденное время. За три недели до анализа на Helicobacter pylori прекращают терапию антибиотиками и анальгетиками. В течение 2-3 суток до прохождения теста запрещено пить алкогольные напитки.

Процесс проведения дыхательного теста заключается в том, что пациент пьет специальный раствор, а далее применяют прибор для измерения двуокиси углерода в выдыхаемом воздухе. Он вырабатывается в результате расщепления соединениями мочевины, принятой перорально до исследования. Экспресс тест на хеликобактер основан на фиксации концентрации аммиака. Анализ проводится путем биохимического исследования. В процессе сравнивают реакцию двух показателей одновременно.

Во время исследования пациент выдыхает воздух в трубку, присоединенную к специальному прибору в течение пары минут. В дальнейшем выпивает раствор мочевины и через небольшой промежуток времени повторно дышит в трубку с противоположной стороны. Преимущество экспресс теста в том, что он не причиняет боли и требует на проведение около 20 минут. Расшифровка показателей имеет следующий вид:

Достоверность полученных результатов при помощи дыхательного теста составляет 95%. Расшифровывать данные и назначать лечение должен гастроэнтеролог либо терапевт. Самостоятельно лечить патологию не рекомендуется, так как можно значительно навредить здоровью.

Цитологическое и гистологическое исследования

Цитологическое исследование проводится путем биопсии ткани из пищеварительной системы. В дальнейшем материал изучают на клеточном уровне с целью определения антител. Метод обладает почти 100% достоверностью полученных результатов. В практике различают три вида биопсии: игловая, инцизионная (взятие пораженной части) и эксцизионная (забор пораженного участка целиком). Материал для цитологического анализа берут с помощью эндоскопа – прибор для сбора визуальной информации о состоянии тканей пищеварительного тракта.

Диагностику проводят строго натощак. При эндоскопическом обследовании можно визуально оценить состояние тканей пищеварительного тракта, а также собрать материал для гистологического изучения. Полученные результаты считают положительными, если обнаружены антитела или уреазы. Цитологическое исследование с биопсией наиболее точный метод диагностики. Иные способы обследования назначают в комплексе для получения полноценной картины о функционировании желудочно-кишечного тракта.

Гистологическое исследование подразумевает морфологическое изучение взятых тканей из желудочно-кишечного тракта. Гистологию применяют при диагностировании злокачественных новообразований. Собранный материал исследуют в условиях лаборатории. Нормой признается отсутствие антител к бактерии Helicobacter pylori. После получения результатов исследования врач сверяет данные с другими обследованиями, жалобами пациента, а затем ставит диагноз и назначает лечение.

ИФА и ПЦР

Иммуноферментный анализ (ИФА) подразумевает исследование крови на наличие бактерии хеликобактер пилори. Также ИФА позволяет обнаружить антитела и их концентрацию к микроорганизму. Выработка антител активируется в результате защитной функции организма после проникновения бактерии. С момента заражения и появлением стойкой иммунной реакцией проходит некоторое время. В связи с этим результаты исследований могут быть недостоверными. При подозрении на заражение лучше сдать повторный анализ для получения точных значений.

В ходе исследования определяют показатели антител IgG, IgM, IgA, вырабатываемые иммунной системой в ответ на атаку чужеродных возбудителей. Отсутствие иммуноглобулинов в крови означает, что человек не заражен бактерией хеликобактер пилори. Если в организме обнаружен антиген IgG, то это свидетельствует о заражении Helicobacter pylori. В данном случае существует вероятность развития язвы и рака. Также антиген определяется некоторое время после успешной терапии. В целях контроля анализ нужно сдать снова через 2-3 недели.

Анализ на хеликобактер также проводят с применением метода ПЦР – полимеразная цепная реакция. Метод основан на исследовании образцов ДНК микроорганизма в реальных условиях. ПЦР считают одним из наиболее достоверных способов. В ходе исследования изучают не только кровь пациента, но также кал на хеликобактер. В качестве исследуемого материала можно использовать слюну или прочие виды отделяемого. ПЦР дает положительный или отрицательный результат независимо от стадии инфицирования.

Анализ на хеликобактер с помощью ПЦР удобен в применении к пожилым пациентам, так как сдавать материал не обязательно в лаборатории. Доставить кал или кровь может другой человек.

Перед тем как сдавать анализ на ПЦР необходимо провести обычную подготовку. Нужно отказаться от пищи за 8 часов до исследования и алкоголя за 2-3 дня. Исследование ПЦР дает достоверность результатов с точностью 95%. Анализы на helicobacter pylori могут быть назначены в совокупности. Сколько именно исследований потребуется, определяет лечащий врач.

Бактерия хеликобактер пилори является коварным микроорганизмом, способным жить в организме человека без каких-либо проявлений долгий период времени. В этом случае ее наличие свидетельствует о бессимптомном носительстве. Решение о необходимости лечения принимает врач исходя из осмотра пациента и данных в анамнезе, также во внимание берут результаты других обследований. Важно знать, что бактерия при неблагополучном стечении обстоятельств способна стать провокатором развития гастрита, язвы и даже рака органов пищеварительного тракта.

proanalizy.com

Как проводится ПЦР анализ на Хеликобактер Пилори?

Диагностический анализ на выявление в организме микроорганизма Хеликобактер Пилори посредством проведения ПЦР распространен во всем мире. Для проведения анализа достаточно сдать кал, никаких инвазивных процедур не требуется (как, например, в случае с ФГДС методом диагностики).

Самыми серьезными минусами этой процедуры считают сравнительно низкую точность и неудобство в сдаче материала для анализа.

К кому и куда обращаться?

ПЦР анализ на наличие в желудочно-кишечном тракте бактерии Хеликобактер Пилори проводится практически во всех, как государственных, так и частных медицинских центрах, в которых имеется своя лаборатория. Назначение на проведение данного вида исследования можно получить у врача-терапевта, гастроэнтеролога и иммунолога.

Прохождение исследования по направлению актуально только для государственных медицинских учреждений. В частных центрах анализ можно проводить без направления, просто по собственному желанию.

Проведение ПЦР исследования для обнаружения Хеликобактер

Процедура это платная. Цена на ПЦР обследование может отличаться в зависимости от клиники и от города. Например, в Москве данное исследование стоит около 600 рублей, тогда как в регионах обойдется в 250-350 рублей. В частных клиниках, по данным на 2016 год, цена выше на 5-10%: в районе 650 рублей для столицы. к меню ↑

Насколько точен тест?

Современные исследования указывают на достаточно высокую точность ПЦР анализа кала на наличие бактерии Helicobacter Pylori. Чувствительность теста колеблется в диапазоне между 64-94%.

Некоторых пациентов может смутить столь большой разброс в чувствительности теста. Однако стоит понимать, что в медицине нет идеально точных диагностических методик, а показатель в 64-94% является более чем удовлетворительным. Для более точного диагноза следует сочетать этот метод с другими способами выявления Хеликобактер (анализ крови, дыхательный тест, и так далее). к меню ↑

Диагностика и лечение Хеликобактер (видео)

к меню ↑

Преимущества и недостатки метода

К преимуществам ПЦР анализа кала относят:

  1. Немалую чувствительность (точность) метода.
  2. Не требуется инвазии (проникновения, как при ФГДС) для выполнения процедуры, а сама процедура технически очень проста.
  3. Абсолютная безопасность для здоровья пациента.
  4. Возможность обнаружения различных штаммов и форм бактерии Helicobacter Pylori.
  5. Возможность с этой же пробы сразу провести анализы и на другие заболевания.

Точность всех существующих способов диагностики Хеликобактер

К недостаткам ПЦР анализа кала относят:

к меню ↑

Общее описание и виды метода

ПЦР тест на наличие в ЖКТ микроорганизма Helicobacter Pylori основан на молекулярно-генетическом анализе многократного умножения образца бактерии Хеликобактер Пилори. Стоит отметить, что для этого метода диагностики берется не кровь, а кал.

ПЦР анализ проводится с помощью двух способов:

При культуральном ПЦР анализе биологический материал кладут в чашку Петри, в которой заблаговременно создаются благоприятные условия для размножения Хеликобактер Пилори.

Через 5-7 дней проводится осмотр чаши и если в ней за этот срок развилась колония микроорганизма Helicobacter Pylori, то результат является положительным. К сожалению, на точность этого метода могут повлиять выпитые накануне антибиотики, о чем пациенты должны быть осведомлены.

Исследование кала для диагностики Helicobacter Pylori

При иммунологическом виде ПЦР анализа маркированные антитела помещают в анализируемый образец. В итоге, при наличии бактерии Хеликобактер Пилори, можно увидеть образование специфических комплексов антиген-антитело, что говорит о положительном результате анализа. к меню ↑

Подготовка и сдача анализа

За трое суток до проведения теста следует отменить прием антибиотиков, слабительных средств, ректальных свеч и замедляющих перистальтику лекарств. При невозможности отмены препаратов из списка (по жизненным показаниям) требуется консультация с врачом.

Сбор кала для анализа осуществляется исключительно в выданную в больнице или лично приобретенную специальную медицинскую тару (ее можно купить в любой аптеке).

Доставлять исследуемый биоматериал нужно как можно быстрее. При невозможности быстрой транспортировки следует хранить тару с биоматериалом при температуре в +3-9 градусов, но не более суток с момента сбора.

Важно: если анализ проводится повторно, после проведения антибактериальной терапии, тест нужно проводить не ранее четырех недель после окончания лечения. В иных случаях он будет неэффективен и покажет ложный результат. к меню ↑

Расшифровка и нормы

Расшифровка результатов для бактериологического метода ПЦР исследования:

Схема лечения Helicobacter Pylori при ее обнаружении

Расшифровка результатов для иммунологического метода ПЦР исследования:

fragmed.ru


Смотрите также